MedicalXpress网站9月27日消息,定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)从采样到获得检测结果需要几个小时,并且该方法需要复杂的热循环仪,以不连续的步骤升高和降低反应的温度。非酶等温扩增方法更简单、更快速,具有替代qRT-PCR的潜力。尽管这些方法在目标基因较短时表现很好,但它们在检测全基因组(长DNA或RNA靶标)时还没有有效发挥作用。
丹麦技术大学健康技术学院(DTU Health Tech)的研究人员发明了一种检测方法,命名为“非酶等温链置换和扩增分析”(NISDA)。该检测用于快速检测SARS-CoV-2的RNA,无需qRT-PCR方法的RNA逆转录步骤。该方法可实现单步检测程序,即用户只需将样品加入一个试管中,放入仪器中等待30分钟即可获得结果。该研究发表在《自然通讯》上。该检测在恒温下工作,不需要酶。NISDA检测能在30分钟内检测出非常低浓度的RNA(10拷贝/微升)。NISDA检测在实验室和医院环境下的特异性为100%,灵敏度为96.77%和100%。
整个检测过程为:将从咽拭子样本中提取的RNA添加到反应混合物中,并在42°C下孵育30分钟。然后进行荧光测量,荧光信号明显高于对照样品(阴性)的样品被认为是阳性。